LAPORAN
PRAKTIKUM IMUNOSEROLOGI
CRP
( COMPLEMENT REACTIVE PROTEIN )
DISUSUN OLEH
ANINDITA RUKMANA DAMAYANTI (P17434113005)
BIDARA RIANI (P17434113006)
CLAUDIA PRAMUDYANINGRUM (P17434113007)
DEWI KEN SETYO NEGARI (P17434113008)
SRI TANTI EKA PUTRI SUBARJO (P17434113034)
REGULER A SEMESTER IV
POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES
SEMARANG
TAHUN 2013 / 2014
I.
Judul
CRP ( COMPLEMENT REACTIVE PROTEIN )
II.
Tanggal
Senin,
16 Maret 2015
III.
Tujuan
Mahasiswa
dapat melakukan uji CRP pada sampel serum probandus.
IV.
Metode
Aglutinasi
V.
Landasan teori
Pemeriksaan
C-Reaktive Protein
Test C-Reaktive Protein (CRP)
pertama kali ditemukan sebagai bahan dalam serum pasien dengan peradangan akut
yang bereaksi dengan polisakarida C-(kapsuler) dari pneumococcus. Ditemukan
oleh Tillet dan Francis Pada tahun 1930. Pada awalnya diperkirakan bahwa CRP
adalah sekresi pathogen seperti peningkatan CPR pada orang dengan berbagai
penyakit termasuk kanker. Namun penemuan sintesis hati menunjukan bahwa CPR
adalah protein asli. Gen CRP terletak pada pertama kromosom (1q21-Q23). CRP
adalah protein 224-residu dengan massa molar dari monomer 25.106 Da. Protein
ini merupakan disc pentametric annular dalam bentuk dan anggota dari kecil
family pentraxins.
Definisi CRP
C-Reaktive Protein (CRP) adalah
protein yang ditemukan dalam darah yang meningkat sebagai respon terhadap
peradangan. Peran fisiologinya adalah untuk mengikat fosfokolin yang di
ekspresikan pada permukaan sel-sel mati atau sekarat (dan beberapa jenis
bakteri) untuk mengaktifkan system pelengkap melalui kompleks C1q. CRP
disintesis oleh hati odalam menanggapi factor yang dilepaskan oleh makrofag dan
sel-sel lemak (adipocytes).
CRP diklasifikasikan sebagai
reaktan fase akut, yng berarti bahwa tingkat protein akan naik sebagai respon terhadap
peradangan. Reaktan umum lainnya adalah fase akut termasuk tingkat sedimentasi
eristosit (ESR) dan jumlah trombosit darah.
Penggunaan CRP dalam test diagnostik
CRP digunakan
terutama sebagai penanda peradangan. Selain gagal jantung, ada factor-faktor
diketahui beberapa yang mengganggu produksi CRP. Mengukur dan mencatat nilai
CRP berguna dalam menentukan perkembangan penyakit atau efektifitas pengobatan.
Darah biasanya dikumpulkan dalam tabung untuk memisahkan serum, dianalisis
dalam laboratorium medis. Berbagai metode analisis yang tersedia untuk
penentuan CRP seperti ELISA, immunoturbidimetri,cepat immunodifusi dan visual
aglutinasi. Pada test High Sensitivity CRP (hs-CRP) berguna untuk mengukur
kadar CRP rendah dengan menggunakan laser nephometry. Test ini memberikan hasil
dalam 25 menit dengan sensitivitas turun menjadi 0,04 mg/L.
Konsentrasi
normal dalam serum manusia yang sehat biasanya lebih rendah dari 10 mg/L,
sedikit meningkat dengan penuaan. Tingkat yang lebih tinggi ditemukan pada
akhir hamil wanita, peradangan dengan ringan dan infeksi virus dengan nilai
10-40 mg/L, pada peradangan aktif, infeksi bakteri memiliki 40-200 mg/L, dan
untuk kasus infeksi barat oleh bakteri dan luka bakar mendapatkan nilai >200
mg/L dalam darah.
CRP
memiliki refleksi lebih sensitive dan akurat dari respon fase akut dibandingkan
ESR. Oleh karena itu, kadar CRP terutama dittentukan oleh tingkat produksi (dan
karenanya tingkat keparahan penyebab pancetus). Dalam 24 jam pertama, ESR
mungkin normal dan CRP meningkat. CRP kembali normal lebih cepat daripada ESR
dalam respon terhadap terapi.
Penggunaan CRP untuk penyakit jantung
Dalam
penelitian yang melibatkan sejumlah besar pasien, tingkat CRP tampaknya
berkolerasi dengan tingkat resiko jantung. Bahkan CRP setidaknya bertindak
sebagai prediksi risiko jantung seperti kadar kolesterol. Karena komponen
inflamasi dari aterosklerosis, peningkatan kadar CRP telah dikaitkan dengan
penyakit kardiovaskuler. Namun, berdasarkan data yang tersedian saat ini tidak
dapat dianggap sebagai factor resiko independe untuk penentu penyakit
kardiovaskuler. Penyakit resiko lainnya untuk penyakit kardiovaskuler, termasuk
tekanan darah tinggi (hipertensi), DM, kolesterol darah tinggi, usia, merokok,
obesitas dan riwayat keluarga penyakit jantung mungkin berkolerasi dengan
peningatan kadar CRP.
VI.
Alat dan bahan
1.
Kaca obyek.
2.
Pengaduk
3.
Pipet mikro
100m
4.
Objek glass
5.
Serum
6.
Reagen
pemeriksaan CRP (ready for use)
Spesifikasi
Reagen :
Merk : Omega
Diagnostic Avitex CRP
Product List
|
Code
|
Description
|
Pack Size
|
Shelf-life
|
CE-marked
|
|
OD023
|
AVITEX® -CRP
|
100T
|
18 months
|
Yes
|
|
OD023/E
|
AVITEX® -CRP (LATEX ONLY)
|
100T
|
18 months
|
Yes
|
|
OD073
|
AVITEX® -CRP
|
50T
|
18 months
|
Yes
|
Products to be stored at 2ºC to 8ºC
VII.
Cara kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan yang diperlukan.
2. Meneteskan 50 µL serum ke dalam objek glass I.
3. Pada objek glass II diteteskan 1 tetes control positif.
4. Pada objek glass III diteteskan 1 tetes control negative.
5. Menambahkan 1 tetes Latex pada masing – masing objek glass.
6. Digoyang – goyangkan objek glass dan diamati aglutinasinya.
7. Untuk menentukan titer
CRP, serum atau plasma penderita diencerkan dengan buffer glisin dengan
pengenceran bertingkat (1/2, 1/4, 1/8, 1/16 dan seterusnya) lalu direaksikan
dengan latex. Titer CRP adalah pengenceran tertinggi yang masih terjadi
aglutinasi.
VIII. Hasil
pengamatan
Dari
praktikum yang dilakukan, diperoleh hasil negatif yaitu tidak terjadi
aglutinasi pada serum probandus.
IX.
Pembahasan
CPR memiliki peran sebagai responfase akut yang berkembang dalam berbagai
kondisi inflamasi akut dan kronis seperti bakteri, infeksi virus, atau jamur,
penyakit inflamasi rematik dan lainnya. Keganasan, dan cedera jaringan atau
nekrotis. Kondisi ini menyebabkan pelepasan sitokin interleukin-6 dan lainnya
yang memicu sintesis CRP dan fibrinogen oleh hati. Selama respon fase akut,
tingkat CRP meningkat pesat dalam waktu 2 jam dari tahap akut dan mencapai
puncaknya pada 48 jam. Dengan resolusi dari respon fase akut, CRP menurun dengan relatif pendek selama 18 jam. Mengukur
tingkat CRP merupakan jendela dalam melihat untuk penyakit menular dan inflamasi.
Secara tepat, peningkatan ditandai di CRP terjadi dengan nekrosis peradangan,
infksi, trauma, dan jaringan, keganasan dan gangguan autoimun. Sejumlah besar
kondisi berbeda yang dapat meningkatkan produksi CRP, peningkatan tingkat CRP
juga tidak dapat mendiagnosa penyakit tertentu. Peningkatan tingkat CRP dapat
memberikan dukungan untuk kehadiran penyakit inflamasi seperti rheumatoid
arthritis, polimyalgia rheumatica atau raksasa-sel arteritis.
Peran fisiologis CRP adalah untuk
mengikat fosfokolin diekspresikan pada permukaan sel-sel mati atau sekarat (dan
beberapa jenis bakteri) untuk mengaktifkan system pelengkap. CRP mengikat
fosfokolin pada mikroba dan sel-sel rusak dan meningkatkan fagositosis oleh
makrofag. Dengan demikian, CRP berpatisipasi dalam pembersihan sel nekrotik dan
apoptosis.
CRP merupakan anggota dari kelas
fase akut reaktan, sebagai tingkat yang meningkat secara dramatis selama proses
inflamasi yang terjadi dalam tubuh. Kenaikan ini disebabkan oleh kenaikan
konsentrasi plasma IL-6, yang diproduksi terutama oleh makrofag serta
adipocytes. CRP mengikat fosfokolin pada mikroba yang berguna untuk membantu
dalam melengkapi mengikat sel-sel asing dan rusak dan meningkatkan fagositosis
oleh makrofag (opsonin fagositosis dimediasi), yang mengekspresikan reseptor
untuk PRK. Hal ini juga diyakini memainkan satu peran penting dalam kekebalan
bawaan, sebagai sistem pertahanan awal terhadap infeksi. CRP naik sampai 50.000
kali lipat dalam peradangan akut, seperti infeksi. Keadaan ini naik diatas
batas normal dalam waktu 6 jam, dan puncaknya pada 48 jam. Sel yang setengah
hidup adalah konstan, dank arena itu tingkat terutama ditentukan oleh tingkat
produksi (tingkat keparahan penyebab pancetus).
Penyebab CRP
meningkat
Secara umum,
penyebab utama CRP meningkat dan penanda peradangan lainnya adalah luka bakar,
trauma,infeksi,peradangan,aktif inflamasi arthritis dan kanker tertentu.
X.
Kesimpulan
Dari
hasil dan pembahasan diatas, dapat disimpulkan bahwa mahasiswa dapat melakukan
pemeriksaan CRP dengan hasil negatif
XI.
Daftar pustaka.
LAMPIRAN
 |
|||||
 |
|||||
 |
|||||
Tidak ada komentar:
Posting Komentar